Куртка N.A.Z.--> 100--> Емкость Annaluma 628-642

Емкость Annaluma 628-642


Reviewed by:
Rating:
5
On 02.01.2019

Summary:

.

Емкость Annaluma 628-642

Емкость для сыпучих продуктов Бабочка 1200 мл диаметр=12 см, высота=20 см. Произведено: Италия.


Обзор:

Tableware Trade Show 2016. МВЦ на Левобережной. Компания Посуд De Luxe

Посуда и аксессуары для кухни :: Емкости для продуктов - Категория - страница 5

Найти предложения в рубрике Емкости для хранения из керамики в Москве. Посмотреть стоимость, сравнить цены и выбрать лучшее предложение.
Керамические емкости для хранения в интернет-магазине Posuda365 Мы предлагаем приобрести керамическ
Хранение продуктов, купить Хранение 5 на tdbasis.ru.

Оптовая торговля от 10000 рублей! Товары телемагазина, тренажеры, посуда, товары для дома, бытовая техника, 5 для кухни уникальные товары, отпариватели.

Силиконовая форма "Шарм" tupperware-nsk.ru

5
Оптовая компания по продаже посуды, сувениров, подарков, предметов интерьера и текстиля
В нашем интернет магазине Вы можете выбрать и купить посуду для хранения по отличной цене с доставкой по Москве и России.

стр.5
Емкость для 5 продуктов "бабочка" 650 мл диаметр=12 см. высота=14 см.-628-640, модель - 628-640, annaluma snc, по цене 2642р. - купить в 5 магазине Фабрика Желаний недорого с доставкой по Москве и всей России!
Большой каталог товаров: банка для сыпучих (высота 12 см, диаметр 12 см) - сравнение цен 5 интернет магазинах, описания и характеристики товаров, отзывы 👍
Увеличить В корзину Банки для хранения Annaluma snc (Италия) Емкость Для Сыпучих Продуктов Бабочка 1200 Мл Диаметр=12 См Высота=20 См 3 674 руб.


В каталоге товаров ООО ТД БАЗИС представлен широкий ассортимент по выгодным ценам, позволяющий нашим покупателям совершать покупки товаров телемагазина, тренажеров, кухонной посуды, отпаривателей крупным и мелким.

Купить посуду для хранения в интернет магазине greenl66.ru Высокое качество по низким ценам. Доставка по Москве и России стр.5


Наш интернет магазин предлагает думаю, Керамогранит Grandwood Natural светло-бежевый 19,8x179,8 (O-GWN-GGU304) давно из керамики в широком ассортименте.

Огромный выбор, отличное качество и приемлемые цены Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.
Показано усиление ингибирования заявленной комбинацией индуцированного метахолином тонуса колец трахеи in vitro против самостоятельного введения активных ингредиентов, а также усиление ею бронхопротекции ингибирования бронхостеноза in vivo.
Description Настоящее изобретение относится к комбинациям фармацевтически активных веществ для применения в лечении респираторных заболеваний, особенно хронической обструктивной болезни легких COPD и астмы.
Для выполнения жизненно важной функции легких требуется наличие тонкой структуры, выдерживающей колоссальное воздействие окружающей среды, включая загрязняющие вещества, микробы, аллергены и канцерогены.
Хозяйские факторы, являющиеся результатом взаимодействий выбора стиля жизни и генетической структуры, оказывают влияние на реакцию на это воздействие.
Повреждение или инфекция легких может приводить к широкому ряду заболеваний дыхательной системы или респираторным заболеваниям.
Ряд этих заболеваний имеет огромную важность для здравоохранения.
Респираторные заболевания включают острое повреждение легких, острый респираторный дистресс-синдром ARDSпрофессиональное заболевание легких, рак легких, туберкулез, фиброз, пневмокониоз, пневмонию, эмфизему, хроническую обструктивную болезнь легких COPD и астму.
Одним из наиболее распространенных респираторных заболеваний является астма.
Астму обычно определяют как воспалительное расстройство дыхательных путей с клиническими симптомами, DKC SPC под лоток основание 100 DKC) следствием периодической обструкции дыхательных путей.
Она клинически характеризуется пароксизмами стерторозного дыхания, диспноэ и кашлем.
Она представляет собой хроническое приводящее к нетрудоспособности расстройство, распространенность и тяжесть которого, по-видимому, возрастают.
Подсчитано, что 15% детей и 5% взрослых среди населения развитых стран страдают от астмы.
Поэтому терапия должна быть направлена на контролирование симптомов, чтобы сделать возможной нормальную жизнь и одновременно обеспечить фундамент для лечения лежащего в ее основе воспаления.
COPD - термин, относящийся к большой группе легочных заболеваний, которые могут негативно воздействовать на нормальное дыхание.
В современных клинических руководствах COPD определяют как болезненное состояние, характеризующееся ограничением воздушного потока, которое не является полностью обратимым.
Обычно ограничение воздушного потока является и прогрессирующим, и ассоциировано с аномальным воспалительным ответом легких на вредные частицы и газы.
Наиболее существенным, способствующим источником таких частиц и газов, по меньшей мере в западном мире, является табакокурение.
У пациентов с COPD присутствует ряд симптомов, включающих кашель, одышку и повышенное выделение мокроты; такие симптомы являются следствием дисфункции ряда клеточных компартментов, включая нейтрофилы, макрофаги и эпителиальные клетки.
Двумя наиболее важными состояниями, охватываемыми термином COPD, являются хронический бронхит и эмфизема.
Хронический бронхит представляет собой продолжительное воспаление бронхов, вызывающее увеличенное продуцирование слизи и другие изменения.
Симптомами у таких пациентов являются кашель и отхаркивание мокроты.
Хронический бронхит может приводить к более частым и тяжелым респираторным инфекциям, сужению и закупорке бронхов, затруднению дыхания и нетрудоспособности.
Легкое теряет свою эластичность, и поэтому эти участки легких становятся расширенными.
Эти расширенные участки удерживают отработанный воздух, и эффективно не заменяют его свежим воздухом.
Это приводит к затрудненному дыханию и может приводить к недостатку кислорода, доставляемого в кровь.
Доминирующим симптомом у пациентов с эмфиземой является одышка.
Терапевтические агенты, используемые в лечении респираторных заболеваний, включают β 2-адренорецепторные агонисты.
Эти агенты также известные как бета-2 β 2 -агонисты могут быть использованы для ослабления симптомов респираторных заболеваний путем расслабления гладких мышц бронхов, уменьшения обструкции дыхательных путей, уменьшения гиперинфляции легких и уменьшения одышки.
Соединения, которые в настоящее время проходят оценку в качестве вводимых один раз в сутки β 2-агонистов, описаны в Expert Opin.
Drugs 14 7775-783 2005.
Другим классом терапевтических агентов, используемых в лечении респираторных заболеваний, являются мускариновые антагонисты.
Мускариновые рецепторы являются семейством рецепторов, сопряженных с белком G GPCRв состав которого входят пять членов семейства M 1, M 2, М 3, М 4 и М 5.
Известно, что три М 1, М 2 и М 3 из этих пяти мускариновых подтипов оказывают физиологическое влияние на легочную ткань человека.
Парасимпатические нервы являются основным путем рефлекторного бронхостеноза в дыхательных путях человека и опосредуют тонус дыхательных путей путем высвобождения ацетилхолина на мускариновых 5 />Тонус дыхательных путей увеличен у пациентов с такими респираторными расстройствами, как астма и хроническая обструктивная болезнь легких COPDи по этой причине разработаны антагонисты мускариновых рецепторов для применения Спрей защитный Deb-Stoko Stokoderm foot care, 100 мл лечении заболеваний дыхательных путей.
Антагонисты мускариновых рецепторов, в клинической практике часто называемые антихолинергическими средствами, получили широкое признание в качестве терапии первой линии для индивидуумов с COPD, и их применение было широко освещено в литературе например, Lee et al.
Несмотря на то, что лечение β 2-адренорецепторным агонистом или мускариновым антагонистом может приносить существенную пользу, эффективность этих агентов часто далека от взято отсюда />Более того, принимая во внимание сложность таких респираторных заболеваний, как астма и COPD, представляется маловероятным, чтобы какой-либо один медиатор сам по себе может успешно лечить это заболевание.
Следовательно, существует настойчивая медицинская необходимость в новых терапевтических средствах против респираторных заболеваний, таких как COPD и астма, в частности для терапий с возможностью модификации заболевания.
Полезный терапевтический эффект можно наблюдать в лечении респираторных заболеваний, если мускариновый антагонист по настоящему изобретению используют в комбинации с β 2-адренорецепторным агонистом.
Полезный эффект можно наблюдать, когда два активных вещества вводят одновременно либо в виде одного фармацевтического препарата, либо в виде отдельных препаратовили последовательно, или раздельно в виде отдельных https://greenl66.ru/100/lkm-suvenirnie-butaforskie-dengi-dlya-vikupa-pachka-100-novie-dollari.html препаратов.
В настоящем изобретении также предложена фармацевтическая композиция, содержащая первый и второй активные ингредиенты в смеси.
Кроме того, в настоящем изобретении предложен набор, содержащий препарат первого активного ингредиента и препарат второго активного ингредиента и возможно инструкции для одновременного, последовательного или раздельного введения данных препаратов пациенту, нуждающемуся в этом.
Названия мускариновых антагонистов представляют собой названия ИЮПАК, сгенерированные с использованием плагина Autonom 2000 для программы IsisDraw, версия 2.
Анион такой соли может представлять собой любой посетить страницу источник приемлемый анион моно- или поливалентной например, бивалентной кислоты.
В одном воплощении данного изобретения анион соли выбран из хлорида, бромида, иодида, сульфата, бензолсульфоната, толуолсульфоната тозилатанападизилата нафталин-1,5-дисульфонатаэдизилата этан-1,2-дисульфонатаизетионата 2-гидроксиэтилсульфонатафосфата, ацетата, цитрата, лактата, тартрата, олеината, мезилата метансульфонатамалеата Z -3-карбокси-акрилатафумарата, сукцината 3-карбокси-пропионатамалата S -3-карбокси-2-гидрокси-пропионатаксинафоата и пара-ацетамидобензоата.
В одном воплощении изобретения антагонист мускариновых рецепторов присутствует в форме бромидной или нападизилатной соли.
В одном воплощении изобретения антагонист мускариновых рецепторов присутствует в форме нападизилатной соли.
В одном воплощении изобретения антагонист мускариновых рецепторов находится в форме бромидной соли.
Вторым активным ингредиентом в комбинации по настоящему изобретению является агонист β 2-адренорецептора.
Агонист β 2-адренорецептора по настоящему изобретению может представлять собой любое соединение или вещество, способное стимулировать β 2-рецепторы и действовать в качестве бронходилататора.
В контексте настоящего описания, если не указано иное, любая ссылка на агонист β 2-адренорецептора включает активные соли, сольваты или производные, которые могут быть образованы из указанного β 2-адренергического агониста и любых энантиомеров и их смесей.
Примерами возможных солей или производных β 2-адренергического агониста являются соли присоединения кислоты, такие как, например, соли соляной кислоты, бромистоводородной кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, метансульфоновой кислоты, уксусной кислоты, фумаровой кислоты, янтарной кислоты, молочной кислоты, лимонной кислоты, винной кислоты, 1-гидрокси-2-нафталинкарбоновой кислоты, малеиновой кислоты, и фармацевтически приемлемые сложные эфиры например, C 1-С 6алкиловые эфиры.
Примеры β 2-адренергического агониста, который может быть использован в фармацевтическом продукте согласно этому воплощению, включают метапротеренол, изопротеренол, изопреналин, альбутерол, сальбутамол например, в виде сульфатаформотерол например, в виде фумаратасальметерол например, в виде ксинафоататербуталин, орципреналин, битолтерол например, в виде мезилатапирбутерол или индакатерол.
Агонист β 2-адренорецептора по этому воплощению может представлять собой β 2-агонист длительного действия т.
В одном воплощении настоящего изобретения агонистом β 2-адренорецептора является формотерол.
В одном аспекте этого воплощения агонистом β 2-адренорецептора является формотерола фумарат.
Очевидно, что изобретение охватывает применение всех оптических изомеров формотерола и их смесей, включая рацематы.
Названия β 2-адренорецепторных агонистов согласно этому воплощению представляют собой названия ИЮПАК, сгенерированные с использованием пакета программ по присвоению названий IUPAK NAME, ACD Labs, версия 8.
Комбинация по настоящему изобретению может обеспечивать полезный терапевтический эффект в лечении респираторных заболеваний.
Примеры таких возможных эффектов включают улучшения одного или более следующих параметров: уменьшение притока воспалительных клеток в легкое, умеренные и тяжелые обострения, FEV 1 объем форсированного выдоха за 5 секундужизненная емкость VCмаксимальная скорость выдоха PEFсчет симптомов и качество жизни.
Для лечения респираторных заболеваний мускариновый антагонист первый активный ингредиент и агонист β 2-адренорецептора второй активный ингредиент по настоящему изобретению могут быть введены одновременно, последовательно или раздельно.
Под последовательным понимают то, что активные ингредиенты вводят в любом порядке один непосредственно сразу за другим.
Они все же могут оказывать желаемый эффект, если их вводят по отдельности, но в этом способе введения они обычно будут введены с интервалов менее 4 часов, более удобно с интервалом менее двух часов, более удобно с интервалом менее 30 минут и наиболее удобно с интервалом менее 10 минут.
Активные ингредиенты по настоящему изобретению могут быть введены посредством перорального или парентерального например, внутривенного, подкожного, внутримышечного или внутрисуставного введения с использованием традиционных лекарственных форм для системного введения, таких как таблетки, капсулы, пилюли, порошки, водные или масляные растворы или суспензии, эмульсии и стерильные инъекционные водные или масляные растворы или суспензии.
Эти лекарственные формы обычно будут включать один или более чем один фармацевтически приемлемый ингредиент, который может быть выбран, например, из адъювантов, носителей, связывающих веществ, смазывающих веществ, разбавителей, стабилизаторов, буферных агентов, эмульгаторов, регулирующих вязкость агентов, поверхностно-активных веществ, консервантов, корригентов и красителей.
Как известно специалисту в данной области техники, наиболее приемлемый способ введения активных ингредиентов зависит от множества факторов.
В одном воплощении настоящего изобретения активные ингредиенты вводят посредством отдельных фармацевтических препаратов.
Следовательно, в одном аспекте ссылка на страницу изобретения предложен набор, содержащий препарат первого активного ингредиента, представляющего собой мускариновый антагонист по настоящему изобретению, и препарат второго активного ингредиента, представляющего собой агонист β 2-адренорецептора, и возможно инструкции для одновременного, последовательного или раздельного введения данных препаратов пациенту, нуждающемуся в этом.
В другом воплощении активные ингредиенты могут быть введены посредством единой фармацевтической композиции.
Следовательно, согласно настоящему изобретению также предложена фармацевтическая композиция, содержащая, в смеси, первый активный ингредиент, представляющий собой мускариновый антагонист по настоящему изобретению, и второй активный ингредиент, представляющий собой агонист β 2-адренорецептора.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть изготовлены путем смешивания мускаринового антагониста первый активный ингредиент с агонистом β 2-адренорецептора второй активный ингредиент и фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем.
Следовательно, в еще одном аспекте настоящего изобретения предложен способ изготовления фармацевтической композиции, включающий смешивание мускаринового антагониста по настоящему изобретению с агонистом β 2-адренорецептора и фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем.
Очевидно, что терапевтическая доза каждого активного ингредиента, вводимая в соответствии с настоящим изобретением, будет варьироваться в зависимости от конкретного используемого активного ингредиента, способа, которым следует вводить активный ингредиент, и подлежащего лечению состояния или расстройства.
В одном воплощении настоящего изобретения мускариновый антагонист по настоящему изобретению вводят посредством ингаляции.
При введении посредством ингаляции доза мускаринового антагониста по настоящему изобретению обычно будет находиться в диапазоне от 0,1 микрограмма мкг до 5000 мкг, от 0,1 до 1000 мкг, от 0,1 до 500 мкг, от 0,1 до 100 мкг, от 0,1 до 50 мкг, от 0,1 до 5 мкг, от 5 до 5000 мкг, от 5 до 1000 мкг, от 5 до 500 мкг, от 5 до 100 мкг, от 5 до 50 мкг, от 5 до 10 мкг, от 10 до 5000 мкг, от 10 до 1000 мкг, от 10 до 500 мкг, от 10 до 100 мкг, от 10 до 50 мкг, от 20 до 5000 мкг, от 20 до 1000 мкг, от 20 до 500 мкг, от 20 до 100 мкг, от 20 до 50 мкг, от 50 до 5000 мкг, от 50 до 1000 мкг, от 50 до 500 мкг, от 50 до 100 мкг, от 100 до 5000 мкг, от 100 до 1000 мкг или от 100 до 500 мкг.
Обычно дозу будут вводить 1-4 раза в сутки, удобно - один или два раза в сутки, и наиболее удобно - один раз в сутки.
В одном воплощении настоящего изобретения агонист β 2-адренорецептора может быть удобно введен посредством ингаляции.
При введении посредством ингаляции доза β 2-агониста обычно будет находиться в диапазоне от 0,1 до 50 мкг, от 0,1 до 40 мкг, от 0,1 до 30 мкг, от 0,1 до 20 мкг, от 0,1 до 10 мкг, от 5 до 10 мкг, от 5 до 50 мкг, от 5 до 40 мкг, от 5 до 30 мкг, от 5 до 20 мкг, от 5 до 10 мкг, от 10 до 50 мкг, от 10 до 40 мкг, от 10 до 30 мкг или от 10 до 20 5 />Обычно дозу будут вводить 1-4 раза в сутки, удобно - один или два раза в сутки, и наиболее удобно - один раз в сутки.
В одном воплощении в настоящем изобретении предложен фармацевтический продукт, содержащий, в комбинации, первый активный ингредиент, представляющий собой мускариновый антагонист по настоящему изобретению, и второй активный ингредиент, представляющий собой агонист β 2-адренорецептора, при этом каждый активный ингредиент приготовлен в виде препарата для ингаляционного введения.
Например, дозирующие ингаляторные устройства можно использовать для введения активных ингредиентов, диспергированных в подходящем пропелленте и с дополнительными эксципиентами, такими так этанол, поверхностно-активные вещества, смазывающие вещества или стабилизаторы, или без них.
Подходящие пропелленты включают углеводородные, хлорфторуглеродные и гидрофторалкановые например, гептафторалкановые HFA пропелленты или смеси любых подобных пропеллентов.
Сухие порошковые композиции и находящиеся под давлением HFA аэрозоли активных ингредиентов можно вводить посредством пероральной или назальной ингаляции.
Для ингаляции желательно, чтобы соединение было тонкоизмельченным.
Тонкоизмельченное соединение предпочтительно имеет средний массовый диаметр менее 10 мкм и может быть суспендировано в пропеллентной смеси с помощью диспергирующего вещества, например жирной С 8-С 20-кислоты или ее соли например, олеиновой кислотысоль желчных кислот, фосфолипида, алкилсахарида, перфторированного или полиэтоксилированного поверхностно-активного вещества, либо другого фармацевтически приемлемого диспергирующего вещества.
Одна из возможностей заключается в смешивании тонкоизмельченного соединения по изобретению с веществом-носителем, например моно- ди- или полисахаридом, сахарным спиртом или другим полиолом.
Подходящими носителями являются сахара, например лактоза, глюкоза, раффиноза, мелезитоза, лактитол, мальтитол, трегалоза, сахароза, маннитол; и крахмал.
Альтернативно, тонкоизмельченное соединение может иметь покрытие из другого вещества.
Кроме того, порошковую смесь можно распределить в твердые желатиновые капсулы, 5 из которых содержит желаемую дозу активного соединения.
Другая возможность заключается в переработке тонкоизмельченного порошка в сферы, которые разрушаются в процессе ингаляции.
Таким сферонизированным порошком можно заполнить резервуар для лекарственного средства многодозового ингалятора, например известного как Turbuhaler ®, в котором дозатор отмеряют нужную дозу, которая затем вдыхается пациентом.
С помощью этой системы активный ингредиент, с веществом-носителем или без него, доставляется пациенту.
Комбинация по настоящему изобретению полезна в лечении или предупреждении таких расстройств дыхательных путей, как хроническая обструктивная болезнь легких COPDхронический бронхит всех типов включая ассоциированную с ним одышкуастма аллергическая и неаллергическая; "синдром стерторозного дыхания у младенцев"острый респираторный дистресс-синдром взрослых ARDSхроническая обструкция дыхательных путей, бронхиальная гиперактивность, фиброз легких, эмфизема легких и аллергический ринит, обострение гиперреактивности дыхательных путей после другой лекарственной терапии, в частности другой ингаляционной лекарственной терапии, или пневмокониоз например, алюминоз, антракоз, асбестоз, халикоз, птилоз, сидероз, силикоз, табакоз и биссиноз.
Сухие порошковые ингаляторы можно использовать взято отсюда введения активных ингредиентов, самих по себе или в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем, в последнем случае либо в виде тонкоизмельченного порошка, либо в виде упорядоченной смеси.
Сухой порошковый ингалятор может быть однодозовым или многодозовым и в нем может использоваться сухой порошок или содержащая порошок капсула.
Дозирующий ингалятор, небулайзер и сухие порошковые ингаляторные устройства общеизвестны, и многие из таких устройств доступны.
В настоящем изобретении также предложен фармацевтический продукт, набор или фармацевтическая композиция по изобретению для одновременного, последовательного или раздельного применения в терапии.
В настоящем изобретении также предложено применение фармацевтического продукта, набора или фармацевтической композиции по изобретению в лечении респираторного заболевания, в частности хронической обструктивной болезни легких или астмы.
В настоящем изобретении также предложено применение фармацевтического продукта, набора или фармацевтической композиции по изобретению в изготовлении лекарственного средства для лечения респираторного заболевания, в частности хронической обструктивной болезни легких или астмы.
В настоящем изобретению также предложен способ лечения респираторного заболевания, включающий одновременное, последовательное или раздельное введение: а терапевтически эффективной дозы первого активного ингредиента, представляющего собой мускариновый антагонист по настоящему изобретению; и б терапевтически эффективной дозы второго активного ингредиента, представляющего собой агонист β 2-адренорецептора; пациенту, нуждающемуся в этом.
В контексте настоящего описания термин "терапия" также включает "профилактику", если нет конкретных указаний на обратное.
Термины "терапевтический" и "терапевтически" следует истолковывать соответственно.
Ожидается, что профилактика особенно важна в отношении лечения субъектов, которые пострадали от предшествующего эпизода рассматриваемого заболевания или расстройства, либо которые иным образом считаются имеющими увеличенный риск рассматриваемого заболевания или расстройства.
Как правило, субъекты с риском развития конкретного заболевания или состояния включают субъектов, имеющих семейную историю данного заболевания или состояния, или субъектов, которые были идентифицированы путем генетического тестирования или скрининга как особенно чувствительные к развитию этого заболевания или расстройства.
Фармацевтический продукт, набор или композиция по настоящему изобретению возможно могут содержать третий активный ингредиент, представляющий собой вещество, подходящее для применения в лечении респираторных заболеваний.
Примеры третьего активного ингредиента, который может быть включен в настоящее изобретение, включают - ингибитор фосфодиэстераз, - модулятор функции хемокиновых рецепторов, - ингибитор функции киназ, - ингибитор протеаз, - стероидный агонист глюкокортикоидных рецепторов и - нестероидный агонист глюкокортикоидных рецепторов.
Примеры ингибитора фосфодиэстераз, которые могут быть использованы в качестве третьего активного ингредиента согласно этому воплощению включают ингибитор PDE4, такой как ингибитор изоформы PDE4D, ингибитор PDE3 и ингибитор PDE5.
Примеры модулятора функции хемокиновых рецепторов, которые нажмите для деталей использовать в качестве третьего активного ингредиента согласно этому воплощению, включают антагонист рецептора CCR3, антагонист рецептора CCR4, антагонист рецептора CCR5 и антагонист рецептора CCR8.
Примеры ингибитора функции киназ, которые можно использовать в качестве третьего активного ингредиента согласно этому воплощению включают ингибитор киназы р38 и ингибитор 1КК ингибитор NF нуклеарный фактор -кВ-киназы.
Примеры ингибитора протеаз, которые можно использовать в качестве третьего активного ингредиента согласно этому воплощению, включают ингибитор эластазы нейтрофилов или ингибитор ММР12 матриксной металлопротеиназы-12.
Изобретение проиллюстрировано следующими неограничивающими Примерами.
В Примерах представлены следующие фигуры.
Порошковая рентгеновская дифрактограмма мускаринового антагониста 7 МА7 : кристаллическая форма 2.
Порошковая рентгеновская дифрактограмма мускаринового антагониста 7 МА7 : кристаллическая форма 3.
Получение мускариновых антагонистов Мускариновые антагонисты по настоящему изобретению могут быть получены следующим образом.
Соли, альтернативные описанным в данном изобретении, можно получить посредством традиционной химии, используя способы, аналогичные описанным.
Общие экспериментальные подробности получения мускариновых антагонистов Если не указано иное, то при получении мускариновых антагонистов использовали следующие общие условия.
Все взаимодействия выполняли в атмосфере азота, если не указано иное.
Спектры NMR получали https://greenl66.ru/100/yaponskaya-gravyura-hirosige-utagava-100-vidov-edo-108-buhta-v-sibaura-20x31-sm-na-bumage.html спектрометре Varian Unity Inova 400 с 5 мм датчиком для инверсного детектирования тройного резонанса, работающим при 400 МГц или на спектрометре Bruker Avance DRX 400 с 5 мм датчиком для инверсного детектирования тройного резонанса типа ТХ1, работающим при 400 МГц или на спектрометре Bruker Avance DPX 300 со стандартным 5 мм датчиком двухчастотным датчиком, работающим при 300 МГц.
Сдвиги приведены в м.
Когда продукты очищали колоночной хроматографией, «флэш-силикагель» относится к увидеть больше для хроматографии, 0,035-0,070 мм 220-440 меш например, силикагель 60 Flukaи приложенное давление азота вплоть до 10 фунт на кв.
Когда использовали тонкослойную хроматографию TLCэтот термин относится к TLC на силикагеле с использованием пластинок, обычно 3×6 см силикагеля на пластинах из алюминиевой фольги с флюоресцентным индикатором 254 нмнапример, Fluka 60778.
Все растворители и имеющиеся в продаже реагенты использовали такими, как они были получены.
Все соединения, содержащие основный е центр ыкоторый очищали с помощью HPLC высокоэффективной жидкостной хроматографииполучали в виде соли TFA трифторуксусной кислотыесли не указано иное.
Условия проведения препаративной HPLC Колонка с обращенной фазой С18 колонка с внутренним диаметром вн.
УФ-детектирование при 230 нм.
Способ ионизации при MS - электрораспыление положительный ион.
LC-MS Способ 2 Waters Micromass ZQ с колонкой с обращенной фазой С18 основе 30×4,6 мм Phenomenex Luna, размер частиц 3 мкмэлюирование А: вода + 0,1% муравьиной кислоты; Б: ацетонитрил + 0,1% муравьиной кислоты.
Способ ионизации MS - электрораспыление положительный и отрицательный ион.
LC-MS Способ 3 Waters Micromass ZQ с колонкой с обращенной фазой С18 основе 30×4,6 мм Phenomenex Luna, размер частиц 3 мкмэлюирование А: вода + 0,1% муравьиной кислоты; Б: ацетонитрил + 0,1% муравьиной кислоты.
Способ ионизации MS - электрораспыление положительный и отрицательный ион.
LC-MS Способ 4 Waters Micromass ZQ с колонкой с обращенной фазой С18 100×3,0 мм Higgins Clipeus с размером частиц 5 мкмэлюирование А: вода + 0,1% муравьиной кислоты; Б: ацетонитрил + 0,1% муравьиной кислоты.
Способ ионизации при MS - на этой странице положительный ион.
Порошковые рентгеновские дифрактограммы XRPD собирали на приборе Philips X-Pert MPD с высоким разрешением в режиме отражения и в конфигурации θ-θ с диапазоном сканирования 2θ от 2° до 40° и 100-секундной выдержкой на один шаг 0,03°.
Рентгеновские лучи генерировали с помощью медной острофокусной трубки, работающей читать статью 45 кВ и 40 мА.
Длины волн прямого пучка рентгеновского излучения составляли 1,5406 Å K α1так как использовали монохроматор.
Данные собирали на держателях с нулевым фоном, куда помещали ~2 мг соединения.
Держатель предоставленный PANalytical был изготовлен из монокристалла кремния, который был разрезан вдоль нерассеивающей плоскости в диапазоне от 2° до 40° 2θ и затем отполирован на оптически плоской финишной поверхности.
Рентгеновские лучи, присущие такой поверхности, гасились экстинкцией Брэгга.
Необработанные данные сохраняли в электронном виде взято отсюда оценку выполняли на необработанных или сглаженных дифрактограммах.
XRPD снимали при температуре и относительной влажности окружающей среды.
Массы образцов варьировались от 1 до 5 мг.
Массы образцов варьировались в диапазоне от 2 до 15 мг.
Профили GVS гравиметрической сорбции пара измеряли, используя прибор для динамической сорбции 5 DVS-1.
Твердый образец массой приблизительно 1-5 мг помещали в стеклянный сосуд, и регистрировали массу образца, на протяжении двуцикличного пошагового метода относительная влажность RH от 40 до 90 до 0 до 90 до 0%, с шагом 10% RH.
GVS-профили регистрировали при температуре окружающей среды.
Сокращения, использованные в Экспериментальном разделе: водн.
Мускариновым антагонистам и промежуточным соединениям, используемым для их получения, описанным в данном изобретении, присвоены названия в соответствии с номенклатурой ИЮПАК, сгенерированные с использованием плагина Autonom 2000 для программы IsisDraw, версия 2.
Промежуточные соединения, используемые в получении мускариновых антагонистов Следующие промежуточные соединения 1-16, используемые в получении мускариновых антагонистов, были получены следующим образом.
Промежуточное соединение 1: 2-Оксо-2-фенил-N-проп-2-инил-ацетамид Оксалилхлорид 6,1 г; 48 ммоль добавляли к раствору фенилглиоксиловой кислоты 6,0 г; 40 ммоль и 3 капель DMF в безводном DCM 50 мл.
Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 3 ч, затем растворитель удаляли.
Остаток переносили в безводный DCM 50 мли раствор охлаждали до 0°С.
Осторожно в течение 10 мин добавляли смесь пропаргиламина 2,2 г; 40 ммоль и триэтиламина 4,05 г; 40 ммользатем смесь оставляли нагреваться до КТ.
Перемешивание продолжали в течение 2,5 ч, затем добавляли воду 10 мл.
Смесь промывали 1 М HCl, насыщенным гидрокарбонатом натрия водн.
Органическую фазу затем сушили Na 2SO 4и растворитель удаляли.
Остаток кристаллизовали из циклогексана с получением продукта в виде светло-коричневого твердого вещества.
Выход: 5,75 г; 76%.
Промежуточное соединение 2: 5-метил-оксазол-2-ил -фенил-метанон Метансульфоновую кислоту 10 г; 104 ммоль по каплям добавляли к раствору 2-оксо-2-фенил-N-проп-2-инил-ацетамида Промежуточное соединение 1 2,4 г; 12,83 ммоль в 1,4-диоксане 20 мл.
Полученный раствор нагревали при 90°C в течение 66 ч.
Реакционную смесь охлаждали, и растворитель удаляли.
Темный остаток разделяли между DCM и водой.
DCM-фракцию промывали 1 М HCl 2×насыщенным раствором гидрокарбоната натрия водн.
Раствор сушили Na 2SO 4и растворитель удаляли, получая неочищенный продукт.
Это позволило получить продукт в виде беловатого твердого вещества.
Выход: 1,0 г; 41%.
Промежуточное соединение 3: 5-бромметил-оксазол-2-ил -фенил-метанон Смесь 5-метил-оксазол-2-ил -фенил-метанона Промежуточное соединение 2 0,8 г; 4,28 ммольN-бромсукцинимида 0,9 г; 5,06 ммоль и 2,2'-азобис 2-метилпропионитрила 56 мг; 0,34 ммоль в четыреххлористом углероде 8 мл нагревали при температуре дефлегмации в течение 1,5 ч.
Реакционную смесь охлаждали до КТ и фильтровали.
Фильтрат разбавляли DCM и промывали водой, насыщенным раствором гидрокарбоната натрия водн.
Ее сушили Na 2SO 4и растворитель удаляли.
Это позволило получить продукт в виде желтого твердого вещества.
Выход: 0,9 г; 79%.
Промежуточное соединение 4: 5-диметиламинометил-оксазол-2-ил -фенил-метанон 5-Бромметил-оксазол-2-ил -фенил-метанон Промежуточное соединение 3 0,18 г; 0,68 ммоль растворяли в 2 М растворе диметиламина в THF 3 мл; 6 ммоль.
Смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч, при этом почти незамедлительно образовывался осадок.
Растворитель удаляли, и остаток разделяли между DCM и насыщенным раствором гидрокарбоната натрия водн.
Водную фазу экстрагировали DCM, объединенную органическую фазу сушили Na 2SO 4и растворитель удаляли, получая продукт в виде оранжевого масла, которое кристаллизовалось при стоянии.
Выход: 0,16 г; 99%.
Промежуточное соединение 5: циклогексил- 5-метил-оксазол-2-ил -фенил-метанол Раствор 5-метил-оксазол-2-ил -фенил-метанона Промежуточное соединение 2 3,0 г; 16 ммоль в 32 мл обезвоженного THF при 0°С в атмосфере азота обрабатывали в течение 10 мин, добавляя по каплям 2 М раствор хлорида циклогексилмагния в диэтиловом эфире 10 мл, 20 ммоль.
Полученный темно-желтый раствор перемешивали при 0°C в течение примерно 30 мин, в течение которых происходило образование осадка, и затем при КТ в течение 1,5 ч.
Реакционную смесь опять охлаждали до 0°C и осторожно обрабатывали насыщенным раствором хлорида аммония водн.
Смесь перемешивали при КТ в течение 10 мин, затем разбавляли водой 10 мл.
Фазы разделяли, и органическую фазу промывали рассолом.
Объединенную водную фазу экстрагировали DCM, а объединенную органическую фазу сушили MgSO 4 и концентрировали в вакууме, получая неочищенный продукт, который растирали с эфиром, отфильтровывали и сушили.
Выход: 3,65 г; 84%.
Промежуточное соединение 6: 5-бромметил-оксазол-2-ил -циклогексил-фенил-метанол Раствор циклогексил- 5-метил-оксазол-2-ил -фенил-метанола Промежуточное соединение 5 3,0 г; 11,1 ммоль в 1,2-дихлорэтане 22 мл обрабатывали N-бромсукцинимидом 2,16 г; 12,2 ммользатем 2,2'-азобис 2-метилпропионитрилом 0,18 г; 2,1 ммоль.
Смесь нагревали до 80°C в течение 2,5 ч и затем оставляли охлаждаться до КТ.
Добавляли насыщенным раствор гидрокарбоната натрия водн.
Органический слой промывали рассолом и объединенные водные слои экстрагировали DCM.
Объединенную органическую фазу сушили MgSO 4 и концентрировали в вакууме, получая неочищенный продукт в виде коричневого масла.
Выход: 1,85 г; 48%.
Промежуточное соединение 7: 2-фенетилокси-этанол Получение 2-фенетилокси-этанола описано в J.
Затем добавляли дополнительный эквивалент трифенилфосфина и четырехбромистого углерода и перемешивали в течение ночи.
Реакционную смесь концентрировали, и остаток очищали колоночной хроматографией на диоксиде кремния, используя циклогексан в качестве элюента.
Концентрирование чистых фракций позволило получить продукт в виде прозрачного масла.
Выход: 1,25 г; 96%.
Промежуточное соединение 9: 2- 4-метил-бензилокси -этанол Смесь гидроксида калия 1,19 г; 21,3 ммоль в https://greenl66.ru/100/chernila-ocp-bkp-110-photo-black-dlya-eps-100-gr.html 12 мл; 213 ммоль нагревали при 130°C в течение 3 ч, затем охлаждали до 35°С и добавляли 4-метилбензилбромид 3,94 г; 21,3 ммоль.
Реакционную смесь нагревали при 35°C в течение 20 ч, охлаждали до КТ и разделяли между водой и диэтиловым эфиром.
Водный слой экстрагировали диэтиловым эфиром.
Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили MgSO 4 и концентрировали досуха с получением коричневого масла.
Чистые фракции объединяли и концентрировали с получением желтой жидкости.
Выход: 2,97 г; 84%.
Промежуточное соединение 10: 1- 2-бром-этоксиметил -4-метил-бензол Получали аналогично способу, использованному для Промежуточного соединения 8, но используя 1- 2-бром-этоксиметил -4-метил-бензол Промежуточное соединение 9 вместо 2-фенетилокси-этанола Промежуточное соединение 9 Выход: 85%.
Промежуточное соединение 11: 4- 3-бром-пропокси -1,2-дихлор-бензол Смесь 3,4-дихлорфенола 1,98 г; 12,14 ммоль1,3-дибромпропана 6,0 мл; 59 ммоль и карбоната калия 2,5 г; 18 ммоль в ацетонитриле нагревали при 80°С в течение ночи.
Реакционную смесь охлаждали до КТ, фильтровали и фильтрат разделяли между водой и диэтиловым эфиром.
Выход: 2,96 г; 86%.
Промежуточное соединение 12: 2- 3.
Промежуточное соединение 13: 4- 2-бром-этоксиметил -1,2-дихлор-бензол Получали аналогично способу, использованному для Промежуточного соединения 8, но используя 2- 3,4-дихлор-бензилокси Atoll EPM Промежуточное соединение 12 вместо 2-фенетилокси-этанола Промежуточное соединение 7 Выход: количественный.
Промежуточное соединение 14: 2- 4-хлор-бензилокси -этиловый эфир метансульфоновой кислоты Раствор метансульфонилхлорида 980 мкл; 12,6 ммоль в безводном DCM 10 мл медленно добавляли к охлажденному 0°C раствору 2- 4-хлор-бензилокси -этанола 2,14 г; 11,46 ммоль и диизопропилэтиламина 2,0 мл; 23 ммоль в безводном DCM 10 мл.
Реакционную смесь оставляли нагреваться до КТ в течение на этой странице />Добавляли воду, и органический слой сушили MgSO 4 и концентрировали.
Выход: 1,87 г; 67%.
Промежуточное соединение 15: 1- 2-бром-этоксиметил -4-хлор-бензол Смесь 2- 4-хлор-бензилокси -этилового эфира метансульфоновой кислоты Промежуточное соединение 14 1,37 г; 5,18 ммоль и бромида лития 1,80 г; 20,7 ммоль в ацетоне 15 мл нагревали при дефлегмации в течение ночи.
Реакционную смесь концентрировали досуха, и остаток разделяли между DCM и водой.
Выход: 0,67 г; 78%.
Промежуточное соединение 16: циклогексил- 5-диметиламинометил-оксазол-2-ил -фенил-метанол Раствор 5-бромметил-оксазол-2-ил -циклогексил-фенил-метанола Промежуточное соединение 6 3,2 г; 9,2 ммоль в THF 40 мл обрабатывали 2 М раствором диметиламина в THF 40 мл; 80 ммоль.
Суспензия образовывалась после перемешивания в течение нескольких минут.
Реакционную смесь оставляли при КТ в течение ночи, затем твердое вещество отфильтровывали и отбрасывали.
Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и остаток разделяли между DCM и насыщенным раствором гидрокарбоната натрия водн.
Органический слой сушили Na 2SO 4 и упаривали с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества.
Выход: 2,74 г; 95%.
Два энантиомера циклогексил- 5-диметиламинометил-оксазол-2-ил -фенил-метанола Промежуточное соединение 16 2,74 г разделяли препаративной хиральной HPLC, используя колонку Chiralpak ® IA 250×20 ммзаполненную силикагелем 5 мкм с иммобилизованным на нем трис 3,5-диметилфенил-карбаматом амилозы.
Первый элюируемый энантиомер Rt 8,5 мин позволил получить S -циклогексил- 5-диметиламинометил-оксазол-2-ил -фенил-метанол Промежуточное соединение 16а в виде белого твердого вещества.
Промежуточное соединение 16а: S -циклогексил- 5-диметиламинометил-оксазол-2-ил -фенил-метанол Выход: 0,73 г; 27%.
Второй элюируемый энантиомер Rt 10,3 мин позволил получить R -циклогексил- 5-диметиламинометил-оксазол-2-ил -фенил-метанол Промежуточное соединение 16b в виде белого твердого вещества.
Промежуточное соединение 16b: R -циклогексил- 5-диметиламинометил-оксазол-2-ил -фенил-метанол Выход: 1,04 г; 38%.
Растворитель удаляли с получением неочищенного продукта.
Очистку осуществляли колоночной хроматографией, элюируя последовательно DCM 2,5%; 5%; 10%; затем 20%-ным МеОН в DCM.
Выход: 50 мг, 43%.
Реакционную смесь концентрировали досуха с получением бесцветного вязкого масла, которое растирали с диэтиловым эфиром с получением белого смолообразного вещества.
Сушка под вакуумом при 45°C в течение 1-2 суток позволила получить белое твердое вещество.
Выход: 142 мг, 86%.
Реакционную смесь добавляли к смеси 23,1%-ного масс.
Затем реакционную смесь охлаждали до 0°C в течение 7 ч и перемешивали при 0°C в течение по меньшей мере 1 ч.
R -Циклогексил- 5-диметиламинометил-оксазол-2-ил -фенил-метанол выделяли из этой рацемической смеси посредством хиральной SMB на псевдоподвижном перейти хроматографии на колонке Chiralpak AD, используя ацетонитрил: изопропанол: диэтилметиламин 90:10:0,1 в качестве элюента.
Методика получения https://greenl66.ru/100/podvesnoy-svetilnik-kutek-mood-cero-cer-zw-1-z-100.html кристаллов кристаллической формы А МА2 - методика 1 R -Циклогексил- 5-диметиламинометил-оксазол-2-ил -фенил-метанол 1 экв.
Смесь постепенно охлаждали до 0°C в течение 3 ч и перемешивали при 0°С в течение по меньшей мере 1 ч.
Методика получения затравочных кристаллов кристаллической формы А 5 - методика 2 R -Циклогексил- 5-диметиламинометил-оксазол-2-ил -фенил-метанол 1 экв.
Полученную суспензию нагревали до температуры дефлегмации 100°Cпри которой достигалось полное растворение.
Анализ с использованием HPLC показал полное превращение в продукт.
Эту суспензию добавляли к реакционной смеси при температуре окружающей среды, в результате чего происходила кристаллизация.
Полученную суспензию охлаждали до 0°C и перемешивали в течение 3 ч при этой температуре.
Неочищенный продукт получали в виде белого твердого вещества с выходом 86%.
Продукт собирали фильтрацией, и осадок на фильтре промывали ТВМЕ 20 мл и сушили на роторном испарителе в течение ночи.
Выход составлял 94% от неочищенного продукта, а чистота 98,3% площади пика по данным HPLC.
Получение кристаллической формы А МА2 К R -циклогексил- 5-диметиламинометил-оксазол-2-ил -фенил-метанолу 1 экв.
Смесь нагревали до температуры дефлегмации 83°С в течение 90 мин и перемешивали при дефлегмации в течение 20 ч.
После этого смесь охлаждали до 57°С в течение 13 мин.
Отбирали образец, и затем реакционную смесь еще раз нагревали до температуры дефлегмации.
Определяли, что степень превращения в продукт в реакции составляет 98,4% по данным HPLC.
Раствор фильтровали через нагретый, встроенный в линию фильтр, посетить страницу сосуд с перемешиванием.
Остаток охлаждали до 52°С.
Полученный раствор перемешивали в течение 2 ч при 50°С.
Добавляли затравочные кристаллы 1,18% масс.
Образовавшуюся суспензию охлаждали до 0°С в течение 3 ч и перемешивали при этой температуре в течение 13 ч.
Выход, полученный этим способом, в масштабе 2,7 кг составлял 90,5%, а чистота составляла 98,3% площади пика HPLC и 98,9% масс.
Потери при высушивании составляли 0,23% масс.
Анализ кристаллической формы А мускаринового антагониста 2 МА2 Образец кристаллической формы А, полученной согласно "Методике получения затравочных кристаллов кристаллической формы А - методика 2", анализировали с использованием XRPD, DSC и TGA.
Температура плавления формы А, как было установлено посредством DSC, составляла 150°С начало ±2°С.
Потеря массы, наблюдаемая до плавления при TGA, была незначительной, около 0,0%.
GVS определение показало увеличение массы на 0,8% масс.
XRPD-спектр кристаллической формы А мускаринового антагониста 2 МА2 представлен на Фиг.
Раствор R -циклогексил- 5-диметиламинометилоксазол-2-ил -фенил-метанола 0,40 г; 1,27 ммоль и 1- 2-бром-этоксиметил -4-хлор-бензола Промежуточное соединение 15 0,67 г; 2,68 ммоль в хлороформе 4 мл и ацетонитриле 4 мл нагревали при 50°С в течение 3 суток.
Выход: 0,68 г; 92%.
Полученный образец МА7 ниже упоминается как аморфная форма МА7.
Выход: 208 мг; 94%.
Солевая форма 1 МА7 аморфную форму как она получена здесь выше нагревали в толуоле с перемешиванием при 60° в течение 48 часов и оставляли охлаждаться до КТ при перемешивании с получением продукта в виде небольших пластинок.
Продукт собирали фильтрацией и сушили под вакуумом при 50°С в течение 3 ч.
Температуру плавления формы 1 определяли посредством DSC; во время которой тестируемая форма 1 претерпевала дегидратацию, после чего дегидратированная форма 1 полностью или частично превращалась в безводную форму, плавилась при 225°С ± 2°С начало.
Содержание воды по данным TGA составляло 0,7% ±0,2%.
GVS определение показало увеличение массы масс.
XRPD-спектр формы 1 представлен на Фиг.
Дополнительные количества формы 1 получали следующим образом: МА7 аморфную форму кристаллизовали из дефлегмирующего ацетонитрила, применяя горячую фильтрацию раствора, и оставляли охлаждаться до КГ при перемешивании, с получением продукта в виде небольших пластинок.
Продукт собирали фильтрацией и перемешивали в толуоле при 60°С в течение 19 ч.
Твердые вещества собирали декантированием растворителя и сушили под вакуумом при 50°С в течение 3 ч.
Результаты XRPD- и DSC-анализов соответствовали Форме 1.
Солевая форма 2 Аморфную форму МА7 нагревали в анизоле при 154°С в течение 3 ч, затем оставляли стоять при КТ в течение 48 ч.
Твердые вещества собирали декантированием растворителя и сушили под вакуумом при 45°С.
Обнаружено, что температура плавления формы Смартфон vivo Y91i 2/32GB по данным DSC составляла 227°С ± 2°С начало.
Содержание 5 по данным TGA составляло 0,0%.
GVS определение показало 0,7%-ное увеличение массы %масс.
XRPD-спектр формы 2 представлен на Фиг.
Дополнительные количества формы 2 получали следующим образом: аморфную форму МА7 кристаллизовали из дефлегмирующего хлорбензола и оставляли медленно охлаждаться до КТ с получением продукта в виде тонких иголок.
Продукт собирали фильтрацией и сушили под вакуумом при КГ в течение ночи.
Результаты XRPD- и DSC-анализов соответствовали форме 2.
Дополнительные количества формы 2 получали следующим образом: аморфную форму МА7 перемешивали в толуоле при 80°С в течение по меньшей мере 60 часов.
Твердые вещества собирали, декантируя растворитель, и сушили под вакуумом при 45°С.
Результаты XRPD- и DSC-анализов соответствовали форме 2.
Продукт собирали фильтрацией и сушили под вакуумом при КТ в течение ночи.
Температуру плавления формы 3 определяли посредством DSC, во время которой тестируемая форма 3 претерпевала дегидратацию и после этого дегидратированная форма 3 полностью или частично превращалась в безводную форму, плавилась при 224°С ± 2°С начало.
Содержание воды по данным TGA составляло 2,1% ±0,2%.
GVS определение показало 3,0%-ное увеличение массы % масс.
XRPD-спектр формы 3 представлен на Фиг.
Кристаллизовали дефлегмирующего из ацетонитрила и оставляли медленно охлаждаться до КТ с получением продукта в виде тонких иголок.
Кристаллизовали из горячего МеОН.
Пример получения описан ниже.
Добавляли н-гептан 1,0 мл и смесь энергично перемешивали.
При отстаивании получали два прозрачных слоя и желтое масло.
Добавляли DCM 1,0 мл вызывает растворение маслаи смесь перемешивали при КТ в течение ночи, что приводило к выпадению в осадок белого твердого вещества.
Выход: 0,17 г; 77%.
Раствор нагревали и затем оставляли охлаждаться опять до КТ.
Полученное кристаллическое твердое вещество отфильтровывали и сушили под вакуумом.
Выход: 83 мг, 78%.
XRPD-анализ полученного этим способом продукта идентифицировал продукт как "солевую форму А".
ЯМР-спектры получали на спектрометре Bruker AVANCE400: частота: 400 МГц; 2-канальный; z-градиент.
Условия HPLC: колонка Phenomenex Luna C18 2 50×4,6 ммразмер частиц 3 мкм.
UV-детекция при 210 нМ.
Элюирование: А: вода + 0,05% трифторуксусной кислоты; Б: ацетонитрил + 0,05% трифторуксусной кислоты.
Детекция - API-ES ионизация при атмосферном давлении с электрораспылениемрежим положительно заряженных ионов.
HPLC показала превращение 98%.
Смесь разбавляли дихлорметаном 4,98 об.
Мешалку отключали, и эмульсия оседала, после чего ее разделяли.
К органическому слою при комнатной температуре в течение 72 мин добавляли смесь трет-бутилметилового эфира tBME 10 об.
Полученную суспензию фильтровали, и осадок на фильтре промывали tBME 2,15 об.
Выход, полученный в этом получении с использованием 130 г R -циклогексил- 5-диметиламинометилоксазол-2-ил -фенил-метанола составлял 216 г 83%.
Суспензию нагревали до температуры дефлегмации и перемешивали при температуре дефлегмации в течение 1 часа.
Затем суспензию охлаждали до 70°С и перемешивали при этой температуре в течение ночи.
Суспензию охлаждали читать полностью комнатной температуры, твердое вещество отфильтровывали, промывали ацетонитрилом 1,4 об.
Смесь R -циклогексил- 5-диметиламинометилоксазол-2-ил -фенил-метанола 1 экв.
Степень превращения в продукт проверяли посредством HPLC.
Реакционную смесь упаривали досуха роторный испаритель при температуре бани 40-50°С при 10-15 мбар 1-1,5 кПаи остаток растворяли в дихлорметане 8,9 об.
К этому раствору в течение по меньшей мере 10 минут добавляли раствор динатриевой соли 1,5-нафталин-дисульфоновой кислоты 1 экв.
Полученную смесь разбавляли дихлорметаном 8,9 об.
перейти на источник отключали, и эмульсия оседала, после чего ее разделяли.
К органическому слою при комнатной температуре в течение по меньшей мере 60 мин добавляли смесь tBME 17,7 об.
Полученную суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 10-60 минут и затем фильтровали.
Осадок на фильтре промывали tBME 2×3,46 об.
Вещество суспендировали в ацетонитриле 22,9 об.
Перемешивание при дефлегмации в течение 60-70 минут, затем охлаждение до 70°С внутренняя температураперемешивание при 70°С в течение 16-24 часов и окончательное охлаждение до 20°С в течение 1 часа.
Суспензию фильтровали, и осадок на фильтре промывали ацетонитрилом 4,61 об.
Выход, полученный в этом способе получения с использованием 25,0 г R -циклогексил- 5-диметиламинометилоксазол-2-ил -фенил-метанола, составлял 38,7 5 78%.
Выход, полученный в этом получении с использованием 129,9 г R -циклогексил- 5-диметиламинометилоксазол-2-ил -фенил-метанола, составлял 203,6 г 79%.
Потеря массы, наблюдаемая до плавления при TGA, была очень низкой 0,0%-0,5%.
GVS определение продемонстрировала увеличение массы менее чем на 0,5% масс.
XRPD-спектр "солевой формы Https://greenl66.ru/100/proel-ebn1204-multikor-25-m.html МА11" представлен на Фиг.
Размер частиц микронизированного вещества, при определении посредством лазерной дифракции Malvern с подачей сухого порошка, составлял d 0,1 0,77 мкм: d 0,51,45 мкм: d 0,9 : 2,65 мкм.
Биологическая активность мускариновых антагонистов Ингибирующие действия соединений - мускариновых антагонистов - определяли с помощью анализа связывания радиоактивного лиганда с мускариновым рецептором.
Мембраны и связанный радиолиганд затем собирали фильтрацией и оставляли сушиться в течение ночи.
Затем добавляли сцинтилляционную жидкость, и связанный радиоактивный лиганд подсчитывали, используя сцинтилляционный счетчик Canberra Packard Topcount.
Затем мембраны и связанный радиоактивный лиганд собирали фильтрацией и оставляли сушиться в течение ночи.
Затем добавляли сцинтилляционную жидкость и связанный радиоактивный лиганд подсчитывали, используя сцинтилляционный счетчик Canberra Packard Topcount.
В анализе связывания с рецептором тестировали следующие соединения: Мускариновый антагонист Ki связывания с М 3, нМ МА 1 9,4 МА 2 0,2 МА 3 0,6 МА 4 0,9 МА 5 2,1 МА 6 0,6 Получение β 2-адренорецепторных агонистов Следующие агонисты β 2-адренорецепторов, которые можно использовать в комбинации по настоящему изобретению, могут быть получены следующим образом.
Общие экспериментальные подробности получения β 2-адренорецепторных агонистов 1H ЯМР-спектры регистрировали на приборе Varian Inova 400 МГц или Varian Atercury-VX 300 МГц.
Центральные пики хлороформа-d δ H 7,27 м.
Колоночную хроматографию выполняли, используя силикагель 0,040-0,063 мм, Merck.
Если не указано иное, то исходные вещества имелись в продаже.
Все растворители и имеющиеся в продаже реагенты имели лабораторную чистоту и были использованы такими, как они были получены.
Сокращения или термины, использованные в примерах, имеют следующие значения: SCX: твердофазная экстракция с сульфоновокислотным сорбентом HPLC: высокоэффективная жидкостная хроматография DMF: N,N-диметилформамид Агонисты β 2-адренорецепторов и промежуточные соединения, используемые для их получения, названы в данном описании на основании изображенных структур с использованием пакета программ по присвоению названий ИЮПАК NAME, ACD Labs, версия 8.
Затем смесь охлаждали до 0°С и обрабатывали трет-бутилакрилатом 8,19 г.
Полученную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи.
После этого неочищенную смесь абсорбировали на оксид алюминия 30 г и элюировали диэтиловым эфиром 200 мл.
Органические фракции концентрировали, получая неочищенное вещество 16,6 гкоторое очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния, элюируя смесью 1:8 диэтиловый эфиртексан, с получением указанного в подзаголовке соединения 12,83 г.
Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, добавляли дополнительно 1 мл трифторуксусной кислоты, и раствор перемешивали в течение ночи.
Смесь концентрировали, переносили в 2 М раствор гидроксида натрия 30 мл и промывали эфиром 2×20 мл.
Водный слой затем подкисляли используя 1 М соляную кислоту и экстрагировали эфиром 2×30 мл.
Объединенные органические слои промывали рассолом 20 млсушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая указанное в подзаголовке соединение 5,66 г в виде прозрачного масла.
После этого смесь концентрировали, повторно растворяли в дихлорметане 10 мл и добавляли по каплям к 5 2- 2-диэтиламиноэтиламино этанола 0,35 г и диизопропилэтиламина 0,56 г в дихлорметане 10 мл.
Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, разбавляли дихлорметан, 50 млпромывали водой 2×20 млрассолом 20 млсушили над сульфатом магния и концентрировали, получая неочищенный продукт 0,91 гкоторый очищали колоночной флэш-хроматографией элюируя 5-7%-ным метанолом в дихлорметане с получением 0,63 здесь указанного в подзаголовке соединения.
читать далее триэтиламин 0,29 ги реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры в течение 1 часа, после чего смесь разбавляли дихлорметан, 30 млорганические фракции промывали бикарбонатом натрия 20 млрассолом 20 млсушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением указанного в подзаголовке соединения 0,21 г.
После перемешивания при комнатной температуре в течение 30 минут добавляли цианоборгидрид натрия 0,020 ги реакционную смесь перемешивали в течение ночи.
Добавляли аммиак 7 н.
Неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией, элюируя 1%-ным аммиаком в 5%-7%-ном метаноле в дихлорметане.
Неочищенный продукт использовали непосредственно на следующей стадии.
Белую твердую дигидробромидную соль 0,058 г собирали фильтрацией.
MS: APCI +ve 579 M+1.
ЯМР указывает на смесь ротамеров приблизительно 2:1 при 298 К.
После завершения добавления раствор нагревали до 15°С, затем до 22°С и оставляли при этой температуре на 16 часов.
Катализатор удаляли фильтрацией и фильтрат упаривали досуха азеотроп с толуолом, 2,5 л с получением 196,2 г указанного в подзаголовке соединения.
Реакционную смесь перемешивали в течение еще 16 часов.
После этого смесь концентрировали, снова растворяли в DCM дихлорметан 1,7 л и добавляли по каплям в течение 1,75 часа при 0°С к раствору N'- 2,2-диметоксиэтил -N,N-диэтилэтан-1,2-диамина 325 г и изопропилдиэтиламина 551 мл в DCM 1,7 л.
Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов, промывали водным насыщенным раствором бикарбоната натрия 5×1 лводой 1,5 лсушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением 650 г указанного в подзаголовке соединения.
После добавления реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение еще 1 часа.
Реакционную смесь концентрировали, и остаток вливали в водный насыщенный раствор бикарбоната натрия 1800 мл, осторожно.
Водную смесь экстрагировали DCM 4×400 мли объединенные экстракты сушили над сульфатом магния и концентрировали.
Остаток использовали непосредственно в следующей реакции.
Реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение 25 минут.
Затем порциями в течение 20 минут добавляли триацетоксиборгидрид натрия 5 ги смесь перемешивали в течение еще 50 минут.
Реакционную смесь вливали в воду 1,8 ли кислый раствор pH 5 промывали трет-бутил-метиловым эфиром ТВМЕ 3×500 мл.
Водную фазу подщелачивали до pH 8 путем добавления твердого карбоната калия и экстрагировали дихлорметаном 3×750 мл ; объединенные органические экстракты сушили над сульфатом магния и концентрировали с получением темного масла.
Его растворяли в этаноле 200 мл и добавляли 48%-ную водную бромистоводородную кислоту 73 мл.
Раствор выдерживали в течение 30 минут, затем упаривали досуха.
Остаток растирали с этанолом 560 мл ; полученное твердое как сообщается здесь собирали фильтрацией и сушили в вакууме нажмите сюда 50°С.
Клейкое твердое вещество суспендировали в кипящем этаноле 100 мл и фильтровали в горячем состоянии.
Собранное твердое вещество сушили в вакууме при 50°С.
После выстаивания в течение ночи полученное твердое вещество собирали фильтрацией и промывали ледяным этанолом 75 мл.
Сушка в вакууме при 50°С в течение 24 ч позволила получить 57 г указанного в заголовке соединения.
Затем смесь охлаждали до 0°С и обрабатывали трет-бутилакрилатом 17,40 г.
Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 часов.
Смесь фильтровали через оксид алюминия 15 гэлюируя эфиром 75 мл.
Собранный фильтрат концентрировали, получая указанное в подзаголовке соединение 34,40 г в виде масла.
Смесь перемешивали при комнатной температуре в 5 3 часов, затем концентрировали в вакууме и азеотропно отгоняли с дихлорметаном 2×10 мл.
Остаток переносили в дихлорметан 300 мл и экстрагировали насыщенным гидрокарбонатом натрия 200 мл.
Основный слой промывали дихлорметаном 20 млзатем подкисляли 2 М соляной кислотой.
Кислотный слой экстрагировали дихлорметаном 2×200 мл.
Органические слои объединяли, промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали, получая указанное в подзаголовке соединение 24,50 г в виде масла.
Реакционную смесь перемешивали в течение еще 16 часов.
Затем смесь концентрировали, снова растворяли в DCM 1,7 л и добавляли по каплям в течение 1,75 часа при 0°С к раствору N'- 2,2-диметоксиэтил -N,N-диэтилэтан-1,2-диамина 20,20 г Пример 16а и изопропилдиэтиламина 34,43 мл в DCM 200 мл.
Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов, промывали водным насыщенным раствором бикарбоната натрия 3×1 лводой 1,5 лсушили над сульфатом натрия и концентрировали, получая 39,50 г указанного в подзаголовке соединения.
После добавления реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение еще 1 часа.
Реакционную смесь концентрировали, и остаток выливали в насыщенный водный раствор бикарбоната Накопительный электрический водонагреватель Komanchi KWH/S 100 Mizu 1800 мл; осторожно.
Водную смесь экстрагировали DCM 3×400 мли объединенные экстракты сушили над сульфатом магния и концентрировали.
Остаток использовали непосредственно в следующей реакции.
Реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение 30 минут.
Затем порциями в течение 20 минут добавляли триацетоксиборгидрид натрия 20,33 ги смесь перемешивали в течение еще 16 часов.
Реакционную смесь выливали в воду 1,8 лподщелачивали до pH 8 путем добавления твердого карбоната калия и экстрагировали дихлорметаном 2×500 мл ; объединенные органические экстракты сушили над сульфатом магния и концентрировали, получая темное масло.
Остаток очищали хроматографией на диоксиде кремния, используя смесь 10% 0,1% водн.
Масло растворяли в этаноле 150 мли добавляли 48%-ую водную бромистоводородную кислоту 10 мл.
Раствор выдерживали в течение 30 минут, затем упаривали досуха.
Остаток растирали с этанолом 100 мл ; полученное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили в вакууме при 50.
Сушка в вакууме при 50°С в течение 24 ч позволила получить 4,96 г указанного в заголовке соединения.
MS: APCI +ve : 563 М+1 ; чистота 99,3% Т9505М.
Элементный анализ CHNS: С: 46,54% 46,39 ; Н: 5,75% 5,70 ; N: 7,94% 7,73 ; S: 4,46% 4,42.
Смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры, и большую часть уксусной кислоты удаляли в вакууме.
Остаток растворяли в дихлорметане и промывали водой, затем раствором карбоната калия ×2затем опять водой.
Органические фракции сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и упаривали, получая желаемое вещество в виде оранжевого масла 12,83 г.
После завершения добавления реакционную смесь нагревали при дефлегмации в течение 5 минут.
Смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры, затем охлаждали до 0°С, и осторожно по каплям добавляли изопропанол 22 млподдерживая температуру ниже 20°С.
Осторожно по каплям добавляли 2 М гидроксид натрия 35 млподдерживая температуру ниже 20°С.
Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут, затем фильтровали через слой целита, который затем промывали THF ×3.
Остаток очищали колоночной как сообщается здесь на диоксиде кремния, используя этилацетат для загрузки вещества, затем 10%-ный триэтиламин в этилацетате, затем смесь 10% триэтиламина, 45% этанола и 45% этилацетата в качестве элюентов и получая желаемое вещество 4,66 г.
Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов.
Растворители удаляли в вакууме, получая желаемое вещество в виде желтого масла 42,0 г.
После завершения добавления смесь перемешивали при 50°С в течение 90 минут.
Смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры, затем медленно добавляли аллилбромид 15,63 млподдерживая температуру 25°С с использованием внешнего охлаждения.
Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, затем разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом ×3.
Органические фракции объединяли, промывали водой, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и упаривали.
Остаток очищали, используя Лакомство для Vitakraft Stick хот-дог хроматографию на диоксиде кремния, загружая с помощью 1%-ного этилацетата в изогексане, затем используя изогексан с этилацетатом 0%, 1%, 2%, 5% в качестве элюентов с получением желаемого вещества 27,0 г.
Было получено несколько смешанных фракций, поэтому их объединяли и повторно очищали, используя колоночную хроматографию на диоксиде кремния, как и ранее, получая еще 4 г желаемого соединения.
Обе партии продукта объединяли, получая в сумме 31,0 г.
Смесь охлаждали и добавляли дополнительные количества меркаптоэтанола 1 мл и AIBN 200 мг.
Затем смесь нагревали при 65°С в течение еще 30 минут.
Вещество очищали колоночной хроматографией на диоксиде кремния, нанося вещество в 20%-ном этилацетате в изогексане, затем элюируя 20%-ным этилацетатом в изогексане, меняя до 50% с получением желаемого вещества 31,94 г.
Полученную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 15 минут.
Реакционную смесь разбавляли этилацетатом, промывали водой, затем 1 н.
HCl, затем насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали, и растворители удаляли в вакууме.
Вещество очищали колоночной хроматографией на диоксиде кремния, элюируя 20%-ным этилацетатом в изогексане, с получением желаемого вещества 12,43 г.
Добавляли цианоборгидрид натрия 1,92 ги смесь перемешивали в течение еще 2 часов.
Растворители удаляли в вакууме, и остаток разбавляли водой, подщелачивали 0,880 водным аммиаком и экстрагировали этилацетатом ×3 во время экстракции фильтровали через целит.
Органические фракции объединяли, промывали рассолом, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и упаривали, получая коричневый остаток 15,5 г.
Вещество очищали колоночной хроматографией на диоксиде кремния, используя DCM с МеОН 2%, 5%, 10%, 20% и 30%, все с 1% 0,880 водн.
NH 3 в качестве элюента, получая желаемое вещество 6,67 г; 38%.
Смесь разбавляли толуолом, и растворители удаляли, затем производили азеотропную отгонку с толуолом ×2.
Остаток растворяли в ацетонитриле, подкисляли 48%-ной водн.
HBr и концентрировали в вакууме не досуха.
Смесь дополнительно разбавляли ацетонитрилом, и выпавшее в осадок твердое вещество собирали фильтрацией, промывали ацетонитрилом и сушили под вакуумом, получая 6,35 г.
Присутствовали примеси 3,8% изомер со стадии дпоэтому вещество снова растворяли в смеси ацетонитрил: вода 1:1 и очищали, используя препаративную HPLC колонка С8 30×80 ммSunfire; буфер на основе NH 4OAc; ацетонитрил 5-50% в течение 10 минут.
Полученное вещество сушили в течение ночи в эксикаторе при 10 мбар 1 кПа над КОН и H 2SO 4.
Полученную диацетатную соль 5 в воде и подщелачивали 0,880 водн.
Образовывалось белое смолообразное вещество, поэтому воду декантировали, и смолообразное вещество сушили в вакууме, получая свободное основание 4,11 г.
Раствор подкисляли 48%-ной водн.
HBr и оставляли кристаллизоваться.
Белое твердое вещество собирали фильтрацией, промывали этанолом и сушили в вакууме, получая 3,81 г партия 1.
Элементный анализ: С Н N S Рассчитано: 41,04 4,70 6,53 9,96 Обнаружено: 1: 41,07 4,69 6,67 9,72 2: 41,08 4,68 6,74 9,67 3: 40,96 жмите сюда 6,75 9,67 Маточные растворы упаривали досуха, затем растирали с ацетонитрилом.
Твердое вещество собирали фильтрацией, получая 719 мг партии 2 суммарно 4,53 г.
Элементный анализ: С Н N S Рассчитано: 41,04 4,70 6,53 9,96 Обнаружено: 1: 40,90 4,69 6,78 9,60 2: 41,01 4,70 6,83 9,60 3: 40,97 4,69 6,76 9,63 Биологическая активность агонистов β 2-адренорецепторов Продуцирование цАМФ, опосредованное адренергическими β 2-рецепторами Подготовка клеток Клетки Н292 выращивали в колбах 225 см 2 в инкубаторе при 37°С, 5% CO 2, в среде RPMI, содержащей 10% об.
FBS фетальной телячьей сыворотки и 2 мМ L-глутамина.
Колбы инкубировали в течение 15 минут в инкубаторе с увлажнением при 37°С, 5% CO 2.
Отделенные клетки ресуспендировали в среде RPMI содержащей 10% об.
FBS и 2 мМ L-глутамин в концентрации 0,05×10 6 клеток на мл.
Культуральные среды удаляли, и клетки дважды промывали 100 мкп аналитического буфера и заменяли 50 мкл аналитического буфера раствор HBSS сбалансированный солевой раствор Хенксасодержащий 10 мМ Приведу ссылку N-2-гидроксиэтил-пиперазин-N-2-этансульфоновая кислота pH 7,4 и 5 мМ глюкозы.
Клетки оставляли при комнатной температуре на 20 минут, после чего добавляли 25 мкл ролипрама 1,2 мМ, приготовленного в аналитическом буфере, содержащем 2,4% об.
Клетки инкубировали с ролипрамом в течение 10 минут, после чего добавляли тестируемые соединения, и клетки инкубировали в течение 60 минут при комнатной температуре.
Конечная концентрация ролипрама в анализе составляла 300 мкМ, и конечная концентрация носителя диметилсульфоксида составляла 1,6% об.
Реакцию останавливали путем удаления супернатантов, промывая один раз 100 мкл аналитического буфера и заменяя их 50 мкл лизирующего буфера.
Клеточный монослой замораживали при -80°С в течение 30 минут или в течение ночи.
Планшет с замороженными клетками оттаивали в течение 20 минут на планшетном шейкере, затем 10 мкл клеточного лизата переносили в 96-луночный белый планшет.
Концентрации цАМФ определяли относительно калибровочной кривой, определенной в том же эксперименте с использованием стандартных концентраций цАМФ.
Строили кривые зависимости ответа от концентрации для Соединения А, и данные аппроксимировали к четырехпараметрическому логистическому уравнению с целью определения как рЕС 50, так и внутренней активности 1А.
Внутреннюю активность выражали в виде доли от максимальной активности, определенной для формотерола в каждом эксперименте.
Результаты приведены в Таблице 1.
Анализы селективности Адренергический α1D-рецептор Подготовка мембран Мембраны получали из клеток почки эмбриона человека 293 НЕК293экспрессирующих рекомбинантный α1D-рецептор человека.
Их разбавляли в аналитическом буфере 50 мМ HEPES, основываясь на этих данных мМ EDTA этилендиаминтетрауксусная кислота ; 0,1% желатина; pH 7,4 с получением конечной концентрации мембран, которая обеспечивала четкое окно между максимальным и минимальным специфическим связыванием.
Экспериментальный метод Анализы проводили в 96-луночных полипропиленовых планшетах с U-образным дном.
DMSO в аналитическом буфере; для определения максимального связывания или 10 мкл BMY7378 конечная концентрация 10 мкМ; для определения неспецифического связывания NSB.
Затем добавляли мембраны для достижения конечного объема 100 мкл.
Выполняли пять промывок, используя 250 мкл буфера для промывки 50 мМ HEPES, 1 мМ EDTA; pH 7,4 при 4°С для удаления несвязанной радиоактивности.
Планшеты сушили, затем заклеивали снизу, используя приспособления Packard для заклеивания планшетов, и в каждую лунку добавляли MicroScint-O ссылка на страницу мкл.
Планшеты заклеивали TopSeal А и связанную https://greenl66.ru/100/marker-kab-mkn-1-4kvmm-up1000sht-korich-iek-umk04-02-1.html фильтром радиоактивность измеряли на сцинтилляционном счетчике TopCount, Packard BioScienceиспользуя 3-минутный протокол подсчета.
Общее специфическое связывание В 0 определяли путем вычитания среднего значения NSB из среднего значения максимального связывания.
Значения NSB также вычитали из значений всех других лунок.
Эти данные выражали в виде процента В 0.
Результаты показаны ниже в Таблице 1.
Адренергический β 1-рецептор Подготовка мембран Мембраны, содержащие рекомбинантные адренергические бета-1-рецепторы человека, получали от Euroscreen.
Их разбавляли аналитическим буфером 50 мМ HEPES, 1 мМ EDTA, 120 мМ NaCl; 0,1% желатина; pH 7,4 с получением конечной концентрации мембран, которая обеспечивала четкое окно между максимальным и минимальным специфическим связыванием.
Экспериментальный метод Анализы проводили в 96-луночных полипропиленовых планшетах с U-образным дном.
DMSO в аналитическом буфере; для определения максимального связывания или 10 мкл пропранолола конечная концентрация 10 мкМ; для определения неспецифического связывания NSB.
Затем добавляли мембраны для достижения конечного объема 100 мкл.
Выполняли пять промывок с использованием 250 мкп буфера для промывки 50 мМ HEPES, 1 мМ EDTA, 120 мМ NaCl; pH 7,4 при 4°С для удаления несвязанной радиоактивности.
Планшеты сушили, затем заклеивали снизу, используя приспособления Packard для заклеивания планшетов, и в каждую лунку добавляли MicroScint-O 50 мкл.
Планшеты заклеивали TopSeal А и связавшуюся с фильтром радиоактивность измеряли на сцинтилляционном счетчике TopCount, Packard BioScienceиспользуя 3-минутный протокол подсчета.
Общее специфическое связывание В 0 определяли путем вычитания среднего значения NSB из среднего значения максимального продолжить чтение />Кроме того, значения NSB вычитали из значений для всех других лунок.
Эти данные выражали в виде процента В 0.
Результаты показаны ниже в Таблице 1.
D2-Рецептор дофамина Подготовка мембран Мембраны, содержащие человеческие рекомбинантные дофаминовые рецепторы подтипа D2, получали от Perkin Elmer.
Их разбавляли в аналитическом буфере 50 мМ HEPES, 1 мМ EDTA, 120 мМ NaCl; 0,1% желатина; pH 7,4 с получением конечной концентрации мембран, которая обеспечивала четкое окно между максимальным и минимальным специфическим связыванием.
Экспериментальный метод Анализы проводили в 96-луночных полипропиленовых планшетах с U-образным дном.
DMSO в аналитическом буфере; для определения максимального связывания или 30 мкл галоперидола конечная концентрация 10 мкМ; для определения неспецифического связывания NSB.
Затем добавляли мембраны для достижения конечного объема 300 мкл.
Выполняли пять промывок с использованием 250 мкл буфера для промывки 50 мМ HEPES, 1 мМ EDTA, 120 мМ NaCl; pH 7,4 при 4°С для удаления несвязанной радиоактивности.
Планшеты сушили, затем заклеивали снизу, используя приспособления Packard для заклеивания планшетов, и в каждую лунку добавляли MicroScint-O 50 мкл.
Планшеты заклеивали TopSeal А и связавшуюся с фильтром радиоактивность измеряли на сцинтилляционном счетчике TopCount, Packard BioScienceиспользуя 3-минутный протокол счета.
Общее больше информации связывание В 0 определяли путем вычитания среднего значения NSB из среднего значения максимального связывания.
Кроме того, значения NSB вычитали из значений для всех других лунок.
Эти данные выражали в виде процента В 0.
Результаты показаны в Таблице 1.
Самцов морских свинок-альбиносов Dunkin-Hartley 300-350 г умерщвляли посредством смещения шейных позвонков и извлекали трахею.
Прикрепленную соединительную ткань удаляли, и каждую трахею разрезали на кольцевые сегменты шириной 2-3 мм.
Их суспендировали в ванночках для органов емкостью 10 мл, содержащих модифицированный раствор Кребса следующего состава мМ : NaCl 117,56; KCl 5,36; NaH 2PO 4 1,15; MgSO 4 1,18; глюкоза 11,10; NaHCO 3 25,00 и CaCl 2 2,55.
Их поддерживали при 37°С и непрерывно газировали 5%-ным CO 2 в O 2.
В раствор Кребса добавляли индометацин 2,8 мкМкортикостерон 10 мкМаскорбат 1 мМCGP20712A 1 мкМ и фентоламин 3 мкМ : индометацин для предотвращения развития тонуса гладких мышц вследствие хотел Предохранитель 6А (DTX 95340285) правы циклооксигеназных продуктов, кортикостерон для ингибирования процесса захвата 2, аскорбат для предотвращения окисления катехоламина, а CGP20712A и фентоламин для того, чтобы избежать любых осложняющих эффектов, связанных с β1- и α-адренорецепторной активацией, соответственно.
Трахеальные кольца подвешивали между двумя крючками из нержавеющей стали, один из которых был присоединен к изометрическому датчику 5, а другой присоединен к неподвижной опоре в ванночке для органов.
Регистрировали изменения изометрической силы.
Хлорид ацетил-β-метилхолина метахолининдометацин, кортикостерон-21-ацетат, адрес фентоламина, аскорбиновую кислоту, метансульфат CGP20712A приобретали у Sigma Chemical Company.
Индометацин растворяли в 10%-ном масс.
Na 2CO 3, кортикостерон-21-ацетат в этаноле, а остальные соединения в DMSO.
Затем на ткани воздействовали 1 мкМ мускаринового агониста метахолина для оценки жизнеспособности ткани.
Ткани промывали, три раза меняя раствор Кребса в ванночках.
Через 30 минут ткани снова, подвергали сокращению с использованием 1 мкМ метахолина.
Когда сокращение достигало плато, в среды в ванночках добавляли 1 нМ формотерола, 10 нМ мускаринового антагониста МА2 кристаллическая форма А или комбинацию обоих и оставляли на 60 минут.
Данные собирали, используя программное обеспечение для Windows ADInstruments Chart5, созданное натяжение измеряли перед добавлением метахолина и после того, как ответ на него достигал плато.
Все ответы выражали в виде процента ингибирования метахолин-индуцированного сокращения.
Результаты изображены на Фиг.
Таблица 2 Соединение % ингибирования 1 мкМ метахолин-индуцированного тонуса 10 мин 20 мин 30 мин 40 мин 50 мин Формотерол 1 нМ 21 37 41 42 44 Соединение А 10 нМ 23 62 94 104 106 Соединение А 10 нМ в присутствии формотерола 1 нМ 55 97 104 105 106 Таблица 2.
Затем на ткани воздействовали 1 мкМ мускаринового агониста метахолина для оценки жизнеспособности ткани.
Ткани промывали, три раза меняя раствор Кребса в ваннах.
Через 30 минут ткани снова подвергали сокращению с использованием 1 мкМ метахолина.
Когда сокращение достигало плато, в среды в ваннах добавляли 1 нМ формотерол, 10 нМ мускариновый было Зеркало IDDIS Cloud 100 с подсветкой (CLO1000i98) поискать МА11 или комбинацию обоих и оставляли на 60 минут.
Данные собирали, используя программное обеспечение для Windows ADInstruments Chart5, созданное натяжение измеряли перед добавлением метахолина и после того, как ответ на него достигал плато.
Все ответы выражали в виде процента ингибирования метахолин-индуцированного сокращения.
совсем Virginia Evans, Jenny Dooley, Henrietta P.

Rogers Career Paths: Art and Design Audio CDs (set of 2) рейтингу изображены на Фиг.
Таблица 3 Соединение % ингибирования 1 мкМ метахолин-индуцированного тонуса 10 мин 20 мин 30 мин 40 мин 50 мин Формотерол 1 нМ 21 37 41 42 44 Соединение В 10 нМ 11 29 49 67 84 Соединение В 10 нМ в присутствии формотерола 1 нМ 38 80 98 103 107 Таблица 3.
Данные in vivo адрес страницы комбинаций Оценка источник статьи легких у анестезированных морских свинок Самцов морских свинок Dunkin-Hartley 300-600 г взвешивали, и им вводили растворитель 0,05 М фосфат; 0,1% Твина 80; 0,6%-ный солевой раствор; pH 6или соединение через внутритрахеальный путь с использованием обратимой газовой анестезии 5%-ный галотан в кислороде.
Животным вводили соединение или растворитель за два часа до введения метахолина.
Животных переносили в систему Flexivent SCIREQ, Montreal, Canada для измерения сопротивления дыхательных путей.
Создавали положительное давление в конце выдоха, равное 2-3 см Н 2О.
Сопротивление дыхательных путей измеряли, используя устройство "моментального снимка" Flexivent продолжительность 1 секунда, частота 1 Гц.
После каждого введения бронхосуживающего средства регистрировали величину пикового сопротивления.
Морских свинок подвергали эвтаназии, используя приблизительно 1,0 мл пентобарбитона натрия Euthatal внутривенно после завершения измерений функции легких.
Процент бронхопротекции, производимой соединением, рассчитывали для каждой дозы бронхосуживающего средства следующим образом:где % изменения R veh представляет собой среднее от максимального изменения в процентах сопротивления дыхательных путей в группе, которую лечили растворителем.
Продукт по любому из пп.
Применение продукта по любому из пп.
Способ лечения респираторного заболевания, включающий одновременное, последовательное или раздельное введение: а терапевтически эффективной дозы первого активного ингредиента, представляющего собой антагонист мускариновых рецепторов, как он определен в любом из пп.
Набор для лечения респираторного заболевания, https://greenl66.ru/100/nakladka-dhs-hurricane-8-mid-krasniy-max.html препарат первого активного ингредиента, представляющего собой антагонист мускариновых рецепторов, как он определен в любом из пп.
Фармацевтическая композиция для лечения респираторного заболевания, содержащая, в смеси, первый активный ингредиент, представляющий собой антагонист мускариновых рецепторов, как он определен в любом из пп.

Комментарии 5

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *